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| 1 | 抗TNFα单链抗体在大肠杆菌中可溶性表达条件的研究显示文摘抗TNFαscFv在E.coliHB2151中以可溶性形式在胞周质中表达,为了进一步提高其表达量,文章通过摇瓶培养对其诱导表达条件进行了研究。将噬菌体抗体库筛选到的阳性克隆感染E.coliHB2151,分别改变诱导温度、诱导时间和诱导剂IPTG的浓度,并在培养基中加入甘氨酸和Triton X-100等添加剂,观察诱导条件的改变对scFv表达和分泌的影响。结果表明,E.coliHB2151在培养5 h对数生长期时开始诱导,在ITPG浓度为0.5 mmol/L条件下,30℃诱导20 h,胞周质中scFv的表达量比优化前增加了一倍,而且在诱导后期加入甘氨酸和Triton X-100后可增加scFv向培养基的分泌量。免疫学印迹法检测抗TNFαscFv能够与天然结构的TNFα结合,识别抗原的构象表位。该工作为其他可溶性scFv表达量的提高提供了可参考的模式。 | 杨涛 杨利军 张建林 张悦红 牛勃 | 2010 | 药物生物技术2010，17，6： | 8 |
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