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| 1 | 人外周血纤维细胞的分离、培养方法显示文摘目的:探索简便易行的外周血纤维细胞体外分离、培养方法极其生物学特征与功能。方法:采用Ficoll密度梯度离心分离法分离成人外周血,所获得的白细胞在一定条件要求下体外培养,采用流式细胞技术、细胞免疫荧光染色等对贴壁生长的成纤维样细胞进行鉴定,在扫描电镜下进一步观察其形态结构。结果:培养至第14天时,外周血纤维细胞开始分化成熟。血液来源的取材、首次换液的时间、细胞的接种密度、血清浓度等多种因素均会对外周血纤维细胞的培养造成影响。免疫荧光染色结果显示培养至12天时CD34和COLⅠ均为强阳性表达,继续培养至28天时,血液来源的细胞表面抗原CD34发生明显丢失,免疫荧光染色几乎不能显色;相反COLⅠ持续表达阳性,取培养14天的贴壁细胞,经流式细胞仪分析,ColⅠ+细胞为81.6%,显示PBFCs不断向成纤维细胞分化的特性。结论:采用密度梯度离心法配合适当的培养条件,成人外周血中存在的前体细胞经体外分离、培养可分化为外周血纤维细胞,并保持其生物学特性。 | 崔磊 李学拥 李跃军 李金清 吕晓星 | 2012 | 现代生物医学进展2012，12，22： | 0 |
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