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| 1 | Sox2诱导小鼠胚胎成纤维细胞直接重编程为神经干细胞显示文摘目的:探讨Sox2诱导小鼠胚胎成纤维细胞( mouse embryonic fibroblasts , MEFs)直接重编程为神经干细胞的方法,为诱导神经干细胞(induced neural stem cells , iNSCs)作为种子细胞治疗脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)奠定实验基础。方法:逆转录病毒感染Sox2转录因子的MEFs在神经干细胞培养基中贴壁培养10 d。随后,悬浮、贴壁反复循环培养3次。 Real-time PCR检测神经干细胞标志基因和多潜能标志基因的表达。 iNSCs在分化培养基中贴壁培养7~14 d,免疫荧光分别检测神经干细胞、神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的标志物nes-tin、MAP2、GFAP和MBP的表达。将iNSCs显微注射至小鼠大脑皮质,7~14 d后免疫荧光检测神经细胞标志物nestin、MAP2、GFAP和MBP的表达。结果:Real-time PCR显示iNSCs的多种神经干细胞标志基因nestin、Blbp、Pax6和zbtb16表达较诱导前显著增高(P<0.05),且iNSCs不表达多潜能相关基因Nanog、Oct4和zfp42。免疫荧光显示iNSCs高表达神经干细胞标志物nestin。免疫荧光同时表明iNSCs可在体内外存活并分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。结论:Sox2可以诱导MEFs直接重编程为神经干细胞。 iNSCs具有自我更新的能力,且在体内外都具有三向分化潜能,可作为修复SCI合适的种子细胞。 | 刘畅 戎利民 刘斌 | 2015 | 中国病理生理杂志2015，31，1： | 2 |
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