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| 1 | 原癌基因c-jun在毒胡萝卜素内酯诱导小鼠胚胎成纤维细胞凋亡中的作用显示文摘目的探讨原癌基因c-jun在毒胡萝卜素内酯(TG)诱导的小鼠胚胎成纤维细胞凋亡中的作用及机制。方法应用TG处理野生型(c-jun+/+),基因敲除型(c-jun-/-)和基因重组型(c-jun Re)小鼠胚胎成纤维细胞后观察细胞生存率;流式细胞术(FACS)和DNA染色进行细胞凋亡分析;蛋白免疫印迹技术分析蛋白c-jun、caspase-12及内质网应激反应分子伴侣Grp78、Gadd153和α-tubulin的表达;共聚焦显微镜观察内质网染色及形态。结果不同浓度TG处理3组细胞4 h后观察细胞生存率,TG在50 nmol/L及100 nmol/L时3组细胞生存率出现差异,c-jun+/+与c-jun-/-组较c-jun Re组生存率减低(P<0.05);TG未处理与处理均未影响c-jun蛋白的表达,c-jun-/-无c-jun蛋白表达,c-jun Re高表达c-jun蛋白;FACS与DNA染色结果显示,TG处理后c-jun-/-组较c-jun Re组DNA含量增高(P<0.05),并在c-jun-/-组出现典型的凋亡细胞亚二倍体DNA;荧光显微镜下观察细胞DAPI染色,与c-jun Re组比较c-jun-/-组DNA染色弱且模糊紊乱;在c-jun+/+与c-jun-/-组中12 h比24 h caspase-12蛋白表达低(P<0.05),与c-jun+/+组比较,c-jun-/-组caspase-12蛋白表达明显增高(P<0.05),而在c-jun Re组几乎无caspase-12蛋白表达;经TG处理后,内质网应激反应分子伴侣Grp78和Gadd153,c-jun Re组此两种标识物的表达明显低于其在c-jun-/-组中的表达,并发现了内质网构造在两种细胞中的不同样式,c-jun Re组相比c-jun-/-组内质网结构更加完整丰富宽广。结论 TG可以引起小鼠成纤维细胞出现细胞凋亡。c-jun基因表达的不同改变了细胞凋亡的程度,这种改变是通过细胞对内质网应激反应的介导。c-jun基因的表达在TG诱导的小鼠成纤维细胞凋亡中起保护作用。 | 张洁 周方舟 曹新冉 任宏生 楚玉峰 王爱红 董波 赵鹏 | 2016 | 中国老年学杂志2016，36，4： | 1 |
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