卵巢癌细胞ERCC1基因VIII外显子剪接变异及功能研究

查看全文 作　　者：李体远 [1];Jing Jie yu [2];Eddie Reed [2]

机构地区：[1]暨南大学医学院附二院深圳市人民医院,广东,深圳,518020;[2]WestVirginiaUniversity,MaryBabbBandolphCancerCenter,Morgantown,WestVirginia26506 索引

出　　处：《中国实验诊断学》索引2004年第8卷第4期,共5页

基　　金：美国'TheNationalCenterforResearchonMinorityHealthandHealthDisparity'资助 摘　　要：目的确认卵巢癌细胞ERCC1基因VIII外显子剪接变异的存在 ,探讨该剪接变异对ERCC1基因表达的作用及其对卵巢癌细胞对铂类药物耐药性的影响。方法采用Northern杂交及RNA酶保护分析确认人卵巢癌细胞内ERCC1基因调控区在RNA水平存在剪接变异。分别构建野生型及缺失VIII外显子的ERCC1表达载体 ,转染中国仓鼠卵巢 4 3 3B细胞 ,采用Westernblot检测ERCC1表达水平研究该剪接变异对ERCC1基因表达水平的影响 ,采用MTT和细胞克隆形成实验研究该剪接变异细胞对铂类药物耐药性的影响。结果卵巢癌细胞ERCC1基因VIII外显子存在剪接变异。Westernblot结果显示该剪接变异不显著影响ERCC1表达水平 ,但CHO 4 3 3B细胞MTT及细胞克隆形成实验表明 ,该剪接变异显著影响细胞对顺铂的耐药性。结论本研究首次证明人卵巢癌细胞、组织ERCC1基因VIII外显子存在剪接变异 ,该变异不显著影响ERCC1基因的绝对表达水平。 关键词：ERCC1 Ⅷ外显子/剪接变异 DNA损伤修复顺铂/耐药

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