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GFAP启动子与骨髓基质干细施神经胶质分化的筛选

查看全文 作  者:[1]张培训索引[1]姜保国索引[1]何湘君 [1]赵富强 [1]魏光如 [1]张殿英索引[1]傅中国 [1]张宏波 高影响力作者 机构地区:[1]北京大学人民医院创伤骨科,100044高影响力机构 出  处:《中华实验外科杂志》索引2004年第21卷第9期,共3页高影响力期刊 基  金:国家863计划(2002AA205071);国家973重大基础研究项目(2001cca01300) 摘  要:目的 研究骨髓基质干细胞体外诱导分化,结合特异性GFAP启动子控制的EGFP的表达来筛选诱导的骨髓基质干细胞。方法构建报告载体pGFAP-EGFP,原代培养的骨髓基质干细胞,在β-ME、RA、forskolin、bFGF、PDGF-AA、HRG-β等复合物的诱导7 d后,pGFAP-EGFP载体转染,G418抗生素筛选。荧光显微镜下观察存活细胞体内的EGFP表达情况,流式细胞仪测定荧光细胞的比率。结果 报告载体pGFAP-EGFP构建成功,转染骨髓基质干细胞后部分细胞存活,流式细胞仪测定82.74%的细胞表达EGFP。筛选出的细胞GFAP免疫细胞化学鉴定阳性。体外扩增后可以得到大量的目的细胞。结论.特异性GFAP启动子控制的EGFP的表达可以在体外有效的进行骨髓基质干细胞的筛选和扩增。筛选后的细胞具有胶质细胞表型,可提供足够的胶质细胞进行神经系统的细胞替代治疗。 关 键 词:GFAP 骨髓基质干细胞 EGFP 筛选 表达 启动子 流式细胞仪 报告载体 活细胞 胶质细胞
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参考文献(6)

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