人类乳头瘤病毒16型E7C亚基因在耻垢分枝杆菌中的表达

查看全文 作　　者：[1]雷蕾;[2]吴少庭;[1]蔡昌学

机构地区：[1]华中科技大学同济医学院,湖北武汉430030;[2]深圳市疾病预防控制中心,广东深圳518020

出　　处：《中国病原生物学杂志》索引2007年第2卷第2期,共4页

摘　　要：目的在耻垢分枝杆菌Mycobaterium smegmatis mc2155中表达人类乳头瘤病毒16型E7C亚基因,为其重组BCG疫苗的研究奠定基础。方法采用电穿孔转化法将重组质粒pBCG-E7C导入耻垢分枝杆菌(M.smegmatismc2155)中,通过卡那霉素抗性筛选经PCR鉴定的重组M.smegmatis mc2155,培养于middlebrook7H9 broth(M7H9)培养基中,并添加10%M7H9 enrichment ADC和0.05%Tween 80,37℃培养48 h^72 h,42℃诱导表达5 h,表达产物进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western blot分析。结果成功构建pBCG3000-E7C质粒,SDS-PAGE显示表达产物的分子质量单位约为6.5 ku,与预期理论值相符,Western blot分析表达产物能被宫颈癌患者血清识别。结论人类乳头瘤病毒16型E7C基因在M.smegmatis mc2155中成功表达。 关键词：人类乳头瘤病毒16型 E7C基因耻垢分枝杆菌基因表达

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