汉坦病毒S基因-多肽噬菌体表面呈现文库的构建

查看全文 作　　者：[1]白雪帆;Fack [2]F;[3]杭长寿;Bautz [2]EKF

机构地区：[1]第四军医大学唐都医院感染科,西安710038;[2]德国海德堡大学分子遗传学研究所;[3]中国预防医学科学院病毒学研究所出血热研究室

出　　处：《细胞与分子免疫学杂志》索引1999年第15卷第1期,共5页

基　　金：欧共体科委资助!CI1-CT94-0024 摘　　要：目的:构建汉坦病毒S基因—多肽片断噬菌体表面呈现文库,以期筛检出抗汉坦病毒InAb识别的病毒核衣壳蛋白抗原表位。方法:用DNaseI随机降解汉坦病毒76-118株S基因,回收50bp~300bp小的DNA片断,与克隆接头连接后插入经SfiI线性化的噬菌体载体fuse5,电穿孔导入MC1061菌建库。转化菌培养扩增后提取重组噬菌体,感染K91细胞测定库容,并随机挑选若干克隆测序。结果:构建的S基因噬菌体文库库容(以转导单位TU表示)为3.375X1010。抽检的8个克隆中有5个含有4种大小和组成不同的正确插人的S基因片断,另外3个克隆均为野生型载体的回复突变。结论:所建文库有足够大的库容和较好的多样性,预计可以满足筛检汉坦病毒核衣壳蛋白抗原表位的需要。 关键词：噬菌体肽库汉坦病毒核衣壳蛋白

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