山茱萸RAPD反应体系的正交优化研究

查看全文 作　　者：[1]叶凡;[1]李开言;[1]王亚芹;[1]鲁阳芳;[1]麻光磊;[1]刘青蓝;[1]任雪玲

机构地区：[1]郑州大学药学院,河南郑州450001

出　　处：《河南农业科学》索引2012年第41卷第4期,共4页

基　　金：国家级大学生创新性实验计划项目(101045902) 摘　　要：为了优化山茱萸RAPD反应条件,采用改良CTAB法提取山茱萸基因组DNA,并采用三因素三水平正交试验对RAPD反应体系中Mg2+、dNTP、引物浓度进行初步优化,在此基础上,对温度条件进一步优化。结果表明:在25μL的RAPD反应体系中各因素的最佳浓度分别为1.925mmol/L Mg2+、0.275mmol/L dNTPs、0.55μmol/L引物、DNA模板40ng和1UTaq DNA聚合酶;引物Tm为36.9℃时,最佳退火温度为35℃;引物Tm为41.0℃时,最佳退火温度为38℃。在最优反应条件下,对100种随机引物进行RAPD扩增,其中93种随机引物均扩增出条带,建立了可靠的反应体系和反应程序,为山茱萸的DNA指纹图谱鉴定建立了基础。 关键词：山茱萸正交优化随机引物扩增多态性DNA DNA指纹图谱

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