乙型肝炎病毒X抗原转导细胞差示表达全长基因C2的克隆及初步功能研究

查看全文 作　　者：[1]刘杰;[2]连兆瑞;[2]潘静波;[1]胡家露;[3]朱明华;[4]窦科峰;[1]丁杰;[1]吴开春;[1]樊代明;Mark Feitelson

机构地区：[1]西安第四军医大学西京医院消化疾病研究所,710032;[2]美国ThomasJefferson大学病理及细胞生物学实验室;[3]上海第二军医大学病理教研室;[4]西安第四军医大学,710032

出　　处：《中华医学杂志》索引2000年第80卷第6期,共5页

基　　金：国家自然科学基金高技术探索资助项目!(39980041) 摘　　要：目的克隆乙型肝炎病毒X抗原 (HBxAg)相关肝癌差示表达基因并做功能研究。方法 (1)用逆转录病毒方法建立表达HBxAg细胞模型。 (2 )用抑制差减杂交做基因差示表达分析。 (3)做RNA印迹分析 (NorthernBlot)及原位分子杂交筛选基因探针。 (4 )用 5′和 3′迅速末端扩增法 (RACEPCR)进行全长基因序列扩增 ,并进行体外蛋白翻译及制备抗体 ,做蛋白质印迹 (WesternBlot)分析。(5 )进行该基因细胞内转导 ,进行功能研究。结果共得到 10个cDNA探针 ,其中 8个因HBX表达上调 ,2个表达下降。经筛选及全长基因扩增 ,得到 1个全长为 1.35kb、编码 113个氨基酸的全长基因C2 ,和蛋白翻译起始因子 (Suil)同源 ,其表达被HBX抑制。初步功能研究显示 ,此基因对细胞生长具有抑制作用 ,并且正常肝组织中其mRNA信号明显高于肝癌组织。结论我们不仅克隆出HBX相关基因C2并进行了功能研究 ,还首次提出DNA病毒 (HBV) 关键词：肝肿瘤互补DNA 乙型肝炎病毒X抗原

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