毕赤酵母重组菌高密度发酵产疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶

查看全文 作　　者：蔡海莺 [1,2 ]Dumba [1]Trish [1]张婷 [2]来佳 [2]赵敏洁 [2]李杨 [1]于林凯 [2]张辉 [2]冯凤琴索引

机构地区：[1]浙江省农业生物资源生化制造协同创新中心浙江省农产品化学与生物加工技术重点实验室浙江科技学院生物与化学工程学院,杭州310023;[2]浙江大学生物系统工程与食品科学学院,杭州310058

出　　处：《中国食品学报》索引2018年第18卷第7期,共9页

基　　金：浙江省重大科技专项(2012C12005-2);浙江省重点研发计划项目(2017C02009);浙江省教育厅科研一般项目(Y201737161) 摘　　要：疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶TLL是一种热稳定、具有位置专一性等良好属性和应用前景的脂肪酶,已成功在多种宿主中实现重组表达。本研究构建含前导肽的TLL脂肪酶毕赤酵母重组工程菌,在摇瓶水平对该重组工程菌的培养和诱导条件进行优化,通过单因素试验,得到的最佳发酵条件:1.5%(体积分数)甲醇,pH 7.0,质量分数0.5%玉米油和0.1%阿拉伯胶,该条件下摇瓶发酵最高酶活为2 265.3 U/mL。以甲醇为唯一碳源进行高密度发酵,202 h后菌体OD600值达到最高282,对应发酵上清液的最高酶活为22 561.4 U/mL。参考摇瓶优化结果,采用辅助碳源与甲醇共诱导高密度发酵,培养和诱导208 h后,最终菌体OD600值达到362,对应发酵上清液的最高酶活为24 522.6 U/mL,较以甲醇为唯一碳源的对应值分别提高了28.37%和10.87%。另外,最高酶活较摇瓶水平发酵的最高酶活2 265.3 U/mL提高10.83倍,表明高密度发酵和共诱导是大幅提高酵母表达重组TLL蛋白的重要手段。 关键词：疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶高密度发酵毕赤酵母重组表达共诱导

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