罗氏沼虾几丁质酶3B基因的克隆及其在蜕皮周期中的表达

查看全文 作　　者：[1,2]叶成凯;[1,2]卢志杰;Sarath Babu [2]V;[3]张晓君;[3]刘晓丹;[1]赵丽娟;[2]潘淦;[1]林蠡

机构地区：[1]仲恺农业工程学院动物科技学院广东省水环境与水产品安全工程技术研究中心广州市水产病害与水禽养殖重点实验室,广东广州510225;[2]华南师范大学生命科学学院广东省水产健康安全养殖重点实验室,广东广州510631;[3]扬州大学动物科技学院,江苏扬州225000

出　　处：《水产学报》索引2019年第43卷第4期,共12页

基　　金：广东省高等教育'创新强校工程'专项(KA170500G);江苏省渔业科技创新项目(D2017-3)~~ 摘　　要：罗氏沼虾的生长发育及繁殖都与蜕皮紧密相关。几丁质酶是甲壳动物在蜕皮过程中最重要的酶之一。本研究对罗氏沼虾蜕皮周期外观特征和腹肢刚毛进行了观察描述,克隆并分析了罗氏沼虾的几丁质酶Ⅲ基因(MrChi3B),制备了几丁质酶Ⅲ蛋白的多克隆抗体,研究了其在蜕皮周期中的表达。罗氏沼虾几丁质酶基因cDNA的开放阅读框为1 143 bp,编码380个氨基酸,大小为41.91 ku。通过氨基酸序列比对发现,MrChi3B与日本沼虾几丁质酶基因(Chi3B)的同源性最高,为94%。MrChi3B含有一个糖苷键水解酶家族18的催化域。实时定量PCR (qRT-PCR)和蛋白印迹法(WB)检测结果显示,MrChi3B在罗氏沼虾多个组织中均有表达,但是不同组织中的表达有差异。在蜕皮期之后,其在胃、表皮和肌肉中的表达量显著上升。在胃中其表达量在蜕皮间期达到最高;在表皮和肌肉中其表达量在蜕皮后期达到最高;肠中的表达量在蜕皮前期和蜕皮期有所上升;眼柄期的表达量在所有蜕皮期都偏低。本研究结果为进一步研究几丁质酶的功能提供参考依据。 关键词：罗氏沼虾几丁质酶基因克隆蜕皮周期表达

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