乙肝病毒X基因真核表达载体的构建及人肝细胞株HL-7702转染

查看全文 作　　者：[1]陈红英;[2]唐南洪;[1]张生君;[1]陈治新;[1]王小众

机构地区：[1]福建医科大学附属协和医院消化内科,福建省福州市350001;[2]福建医科大学附属协和医院肝胆外科,福建省福州市350001

出　　处：《世界华人消化杂志》索引2004年第12卷第3期,共4页

摘　　要：目的:构建表达乙肝病毒(HBV)X基因的人肝细胞株. 方法:用PCR法扩增HBVX基因序列,将其添A后连至PUCmT载体上,用EcolⅠ和Hind Ⅲ双酶切PUCmT-X和PcDNA3载体,连接酶切片段PcDNA3及X片段以构建重组质粒PcDNA3-X.用脂质体转染法将PcDNA3-X及空质粒PcDNA3导入肝细胞HL-7702中,G418选择培养,RT- PCR鉴定其稳定表达. 结果:已构建的PcDNA3-X经序列测定含有完整的HBV X 基因片段,转入HL-7702细胞后经RT-PCR证实该细胞有稳定表达X蛋白. 结论:成功构建了表达HBV X基因的肝细胞株,为进一步探讨HBV X基因在肝炎与肝癌发生中的作用提供了理想的实验模型. 关键词：乙肝病毒 X基因真核表达载体 HL-7702细胞株脂质体转染法肝癌

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